Микробиология, понятие микробиологии, статьи по микробиологии, микробиологические процессы

Записи с меткой «агглютинации»

Рассмотрим основные принципы реакций иммунитета, имеющие наиболее важное практическое значение, реакция агглютинации Реакция агглютинации протекает в две фазы. В первой фазе происходит адсорбция агглютининов на поверхности клетки, во второй образование агрегатов (агглютината) и выделение их в осадок, причем этот процесс происходит только в присутствии электролитов. Предполагалось, что антитела только изменяют чувствительность клеток, а сам феномен осуществляется в результате воздействия электролитов. В настоящее время считается, что процесс агглютинации происходит в соответствии с теорией решетки, согласно которой агглютинат образуется вследствие того, что двухвалентные антитела, одним активным центром соединяющиеся с одной клеткой, другим с другой, образуют плотное их соединение и выпадение в осадок. В пользу этой точки зрения говорят данные, что при образовании агглютината существенное значение имеют определенные количественные соотношения антигена и антител (феномен оптимума) и задержка агглютинации при избытке или недостатке антител. Эти реакции применяются для диагностики инфекционных заболеваний, определения природы возбудителей и их атттигешгай структуры.

Для диагностических целей реакция применяется в двух направлениях 1) определение неизвестных антител с помощью известного антигена;
2) определение вида микроба с помощью известных антител.
Например, если у больного на основании клинических данных предполагается брюшной тиф или бруцеллез и хотят точно установить диагноз заболевания без выделения чистой культуры возбудителя. Тогда берут кровь, из нее получают сыворотку и к одной порции добавляют возбудителя брюшного тифа, а к другой возбудителя бруцеллеза. Реакция агглютинации произойдет только в одной порции сыворотки. Если агглютинация произошла с бактериями брюшного тифа, это означает, что они являются возбудителем заболевания.
Однако при микробиологической диагностике инфекционных заболеваний наиболее точным и достоверным методом является выделение чистой культуры возбудителя, вид которого определяется не только по морфологической и биохимической характеристике, но и по его серологическим свойствам, т. е. способности агглютинироваться со ответствующими иммунными сыворотками, получаемыми при, животных заведомо известными антигенами. Если, например, предполагается, что выделен возбудитель дизентерии пли туляремии, тогда для реакции агглютинации берется иммунная сыворотка, полученная от животных, иммунизированных именно этими микробами. Таков принцип применения реакции агглютинации для диагностических целей. Однако в связи с тем, что в сыворотке могут быть нормальные антитела пли они могли возникнуть в результате предохранительных прививок, а также вследствие сложной антигенной структуры микробов, применяется целый ряд методических приемов, которые дают возможность точно определить специфичность реакции, т. е. выяснить истинную природу заболевания. Наиболее простым является метод разведения сыворотки физиологическим раствором. Разведение сыворотки при различных заболеваниях делается неодинаково. В зависимости от агглютинабельности возбудителя и от количества антител, формирующихся в процессе заболевания, сыворотка разводится в 10, 100 и более раз. Например, в случае определения антител при брюшном тифе сыворотка разводится в 50, 100, 200, 400 и 800 раз. При этом чем в большем разведении получается агглютинация, тем достовернее результат. Специфической реакцией в данном случае считается разведение не менее чем в 50 раз. При постановке реакции с неизвестным микробом и заведомо известной иммунной сывороткой она разводится до ее конечного титра, т. е. до того предельного разведения, с которым она агглютинировала с микробом, взятым для иммунизации. Специфической реакция считается только тогда, коггда она положительна в разведении, равном не менее чем половине титра. Например, если иммунная брюшнотифозная сыворотка имеет титр 1 10 ООО, то специфической считается агглютинация в разведении не менее чем 1 5000. При постановке реакции агглютинации, когда определяются в сыворотке больного антитела, метод разведения не всегда дает желаемые результаты. Иногда положительная реакция агглютинации наступает в одних и тех же разведениях с различными микробами, что чаще всего бывает тогда, когда антитела возникают в организме в результате применения предохранительных прививок. В этих случаях для определения истинной причины заболевания наблюдают за динамикой нарастания количества (титра) антител. С этой целью реакция ставится повторно через 1 2 суток. Нарастание количества антител дает возможность судить о природе возбудителя, так как титры антител, возникающих после вакцинации, а также количество родственных или групповых антител остаются без изменения. Но иногда и этот метод не дает желаемых результатов, так как при повторной реакции получается положительная реакция с двумя антигенами в одних и тех же разведениях. В этих случаях применяется реакция адсорбции истощения антител по Кастелляни.