Микробиология, понятие микробиологии, статьи по микробиологии, микробиологические процессы

Архив автора

Преципитиногены отличаются большой устойчивостью к высокой температуре, они выдерживают длительное кипячение, сохраняя способность реагировать с антителом. На этом принципе основана реакция термопреципитации Асколи. При постановке этой реакции, применяемой чаще всего для диагностики сибирской язвы, из исследуемого материала готовится вытяжка в физиологическом растворе при кипячении. Полученную вытяжку фильтруют и фильтрат осторожно наслаивают на иммунную преципитирующую сыворотку. На границе соединения антигена с антителом через несколько минут появляется преципитат, сначала в виде слабой опалесценции, а затем в форме отчетливо видимого кольца (75). Реакция преципитации является очень чувствительным тестом, она дает возможность обнаруживать ничтожные количества белка и гаптена. Например, иммунные антипневмококковые сыворотки преципитируют полисахарид пневмококка при разведении в миллион раз.

Реакцию преципитации впервые наблюдал Краус в 1897 г. Он обнаружил, что прозрачный фильтрат чумных бактерий при смешивании с противочумной сывороткой становится мутным, а затем образуются хлопья, оседающие на дно. В дальнейшем было показано, что сыворотки животных, получивших тифозные и холерные культуры, а также любой гетерогенный белок, например сывороточный или яичный, молоко, дефибринированную кровь и др., также обладают преципитирующей активностью.
Реакция преципитации имеет большое сходство с реакцией агглютинации. Различие заключается только в свойствах антигена. При агглютинации с антителами реагируют крупные частицы бактерии, эритроциты и другие клетки, при преципитации антигены, имеющие величину белковых молекул, находящихся в дисперсном коллоидном состоянии. В связи с этим и методические приемы при постановке реакции преципитации несколько отличаются от реакции агглютинации. При реакции преципитации разводится антиген, а не антитело, так как для обволакивания и осаждения более мелких частиц требуется значительно большее количество преципитина, чем агглютининов для склеивания более крупных частиц агглютиногена.

Реакция торможения гемагглютинации основана на способности антител подавлять агглютинацию эритроцитов. Эта реакция применяется для определения титра антител (по известному вирусу) и дифференциации вида или типа вируса. При определении антител к разведенной сыворотке сначала добавляют заведомо известный антиген, а затем эритроциты. Если в сыворотке имеются антитела, соответствующие взятому антигену, агглютинация эритроцитов не возникает. Задержка агглютинации эритроцитов наступает и при обратной постановке реакции, т. е. когда берется известная иммунная сыворотка и к ней добавляется неизвестный вирус. Если он специфичен для антител иммунной сыворотки, то при прибавлении эритроцитов агглютинация не возникает.

Для диагностики инфекционных заболеваний главным образом вирусной природы применяется реакция непрямой, или пассивной, агглютинации.
Под непрямой, или пассивной, агглютинацией понимают реакцию, в которой антитело агглютинирует антиген, адсорбированный на различных субстратах. В качестве адсорбентов чаще всего применяют эритроциты различных животных, порошок целлюлозы или бентонита. Методически реакция непрямой агглютинации осуществляется следующим образом. Сначала эритроциты человека группы О, барана или другого животного смешивают для адсорбции с определенным антигеном, а затем к этим эритроцитам прибавляют иммунную сыворотку больных. Эта реакция нашла широкое применение для обнаружения антител, диагностики вирусных инфекций и выявления антигенных различий некоторых вирусов.
реакция гемагглютинации и реакция торможения гемагглютинации Сущность реакции гемагглютинации заключается в способности некоторых вирусов (вирус гриппа, арбовирусы, кишечные и другие вирусы) вызывать агглютинацию эритроцитов. Это не реакция иммунитета, а свойство вирусов при адсорбции на поверхности эритроцитов изменять их поверхностные структуры, что сопровождается их склеиванием.

Если же при обратной постановке реакции полного истощения сыворотки не происходит, говорят о наличии у обоих изученных комплексов как общих, так и специфических антигенов. На принципе адсорбции или истощения антител основан и метод определения антигенной структуры микроорганизмов с помощью так называемых монорецепторных сывороток. Эти сыворотки получаются следующим образом. После иммунизации полученная сыворотка насыщается всеми неспецифическими групповыми антигенами. Неистощенными остаются антитела к специфическим антигенам. Если в сыворотке после адсорбции и удаления центрифугированием агглютинированного антигена остаются антитела только к одному антигену, такие сыворотки называются монорецепторными. Эти сыворотки применяются для детального изучения антигенной структуры бактерий, точной диагностики заболеваний и идентификации микроорганизмов.